本发明涉及一种阳性转染细胞亲和分选试剂盒及方法。为了克服难转染细胞中基因递送效率低的难题,本发明提供了一种亲和细胞分选系统,可有效分选转染阳性细胞。本发明构建了一系列可靶向定位细胞膜外表面的细胞亲和纯化标签,在转染阳性的细胞中表达带有亲和标签的EGFP荧光蛋白,并在GPI膜定位信号的作用下定位到细胞膜表面,基于亲和标签和配体之间的高亲合性相互作用,通过配体偶联的磁珠将转染阳性的细胞分离进行检测和定量。该分选方法在操作简单、分选获得的细胞损伤较小,对基因表达和功能具有较小的干扰,可继续培养或直接用于下游实验,尤其适合在难转染细胞中解决转染效率低的难题。